Taq polimerase Assim como a replicação do DNA em um organismo, a PCR requer uma enzima DNA polimerase que produz novas fitas de DNA, usando as fitas existentes como moldes. A DNA polimerase normalmente usada na PCR é chamada de Taq polimerase, em homenagem à bactéria tolerante ao calor da qual foi isolada (Thermus aquaticus).
Por que uma DNA polimerase termoestável é necessária para PCR?
aquaticus é uma bactéria que vive em fontes termais e fontes hidrotermais, e a Taq polimerase foi identificada como uma enzima capaz de suportar as condições de desnaturação de proteínas (alta temperatura) exigidas durante PCR.
Qual etapa é usada na enzima termoestável de PCR?
Uma DNA polimerase termoestável é usada em ciclos repetidos de hibridização de primers, síntese de DNA e dissociação de DNA duplex para servir como novos modelos. A amplificação teórica do DNA molde, assumindo que os reagentes não são limitantes e a enzima mantém a atividade completa, é 2 onde n é o número de ciclos.
Em quais etapas das enzimas de PCR são usadas?
Três etapas de PCR─desnaturação, anelamento e extensão─como mostrado no primeiro ciclo, e a amplificação exponencial do DNA alvo com ciclagem repetida.
Qual enzima é usada para amplificação em PCR?
Taq DNA polimerase é comumente usado para amplificar produtos de PCR de 5kb ou menos. Produtos de PCR na faixa de 5 a 10 kb podem ser amplificados com Taq DNA polimerase, mas geralmente exigem mais otimização do que produtos de PCR menores.